啤酒設(shè)備后期酵母培養(yǎng)

啤酒設(shè)備后期酵母培養(yǎng)

首先人員上的規(guī)定：各級(jí)擴(kuò)培人員的無菌意識(shí)要高度一致，在實(shí)驗(yàn)室階段，一定嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)程進(jìn)行；生產(chǎn)現(xiàn)場擴(kuò)培人員上崗前要換好指定工作服，擴(kuò)培操作前要用75%酒精擦拭雙手，避免發(fā)生交叉污染。

其次，對(duì)環(huán)境要求也非常嚴(yán)格：無種室應(yīng)按要求定期消毒，紫外線照射至少30min，實(shí)驗(yàn)儀器應(yīng)隨時(shí)在0.1MPa之下消毒20-30min；接種和添加麥汁過程之中的所有管道和閥門必須用熱水或蒸汽完全消毒。室內(nèi)地面和墻面也應(yīng)定期噴灑一定濃度的消毒劑進(jìn)行消毒滅菌。室內(nèi)空氣在接種前應(yīng)完全消毒，接種后應(yīng)進(jìn)行二次消毒。

然后是擴(kuò)培麥汁的要求：種子罐之前的麥汁盡量取頭號(hào)麥汁，加水調(diào)節(jié)濃度為11～120P ，滅菌要求0.1MPa，20～30min；也可經(jīng)過特殊處理后，進(jìn)行干熱滅菌，要求120℃恒溫3h；現(xiàn)場擴(kuò)培用麥汁為沉淀槽中的熱麥汁，濃度在120P左右，α-氨基氮應(yīng)在180～220mg/L，可添加適量的酵母營養(yǎng)鹽。麥汁滅菌方法同前。

最后是壓縮空氣：用于通風(fēng)和供氧的壓縮空氣，必須經(jīng)過三級(jí)膜過濾后才能使用。同時(shí)，氧氣含量要適當(dāng)，酵母在氧氣不足的情況下生長緩慢，而氧氣過多會(huì)造成酵母細(xì)胞呼吸酶活性過強(qiáng)，酵母繁殖過多不利于后期發(fā)酵。一般來說，在進(jìn)入培養(yǎng)罐之前，膨脹的培養(yǎng)酵母應(yīng)該每天充氣三次，每次20-30分鐘。

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>

    學(xué)習(xí)酵母菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)方法，為實(shí)驗(yàn)室啤酒發(fā)酵準(zhǔn)備菌種。

二、實(shí)驗(yàn)原理：

    在進(jìn)行啤酒發(fā)酵之前，必須準(zhǔn)備好足夠量的發(fā)酵菌種。在啤酒發(fā)酵中，接種量一般應(yīng)為麥芽汁量的10%（使發(fā)酵液中的酵母量達(dá)1×107個(gè)酵母/mL），因此，要進(jìn)行大規(guī)模的發(fā)酵，首先必須進(jìn)行酵母菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)。擴(kuò)大培養(yǎng)的目的一方面是獲得足量的酵母，另一方面是使酵母由最適生長溫度（28℃）逐步適應(yīng)為發(fā)酵溫度（10℃）。

三、實(shí)驗(yàn)器材：

    恒溫培養(yǎng)箱，生化培養(yǎng)箱，顯微鏡等。

四、實(shí)驗(yàn)步驟：

    本次實(shí)驗(yàn)擬用60升麥芽汁，因此應(yīng)制備6000 mL含1×108個(gè)酵母/mL的菌種，以每班10個(gè)組計(jì)算，每個(gè)組應(yīng)制備約600 mL菌種。建議流程如下：                                                                                   

 菌種擴(kuò)大:    麥汁斜面菌種→麥汁平板—28℃，2天→鏡檢，挑單菌落3個(gè)，接種 50mL麥汁試管（或三角瓶）—20℃，2天（ 每天搖動(dòng)3次）→550mL麥汁三角瓶—15℃，2天（每天搖動(dòng)3次）→計(jì)數(shù)備用。                

 1.  培養(yǎng)基的制備

取協(xié)定法制備的麥芽汁濾液（約400 mL），加水定容至約600 mL，取50 mL裝入250 mL三角瓶中，另550 mL至1000 mL三角瓶中，包上瓶口布后，0.05 Mpa滅菌30分鐘。

2.  菌種擴(kuò)大培養(yǎng)

按上面流程進(jìn)行菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)（斜面活化菌種由教師提供）。注意無菌操作。

五、注意事項(xiàng)：滅菌后的培養(yǎng)基會(huì)有不少沉淀，這不影響酵母菌的繁殖。若要減少沉淀，可在滅菌前將培養(yǎng)基充分煮沸并過濾。